欢迎来到现代果业大数据云服务平台

苹果无病毒苗木繁育规程

发布时间:2022年11月20日 作者:本站编辑 来源:本站原创 分类:行业规范

茎尖培养脱毒法

B1分离培养
从田间大树上切取2~3cm长的新梢顶尖,用70%酒精浸渍半分钟,用0.1%升汞灭菌5min,无菌水冲洗3~5遍,在解剖镜下剥离幼叶和叶原基,切取0.1~0.2mm的茎尖,接种到分化培养基上,在25℃士 2℃、光照度1500~20001x、光照10h/天的条件下培养。每个月换一次培养基,3~4个月后可分化出新芽。

B2增殖培养
培养基、培养条件与初代培养相同,每隔30~40天转接一次。增殖试管苗可采用酶联免疫吸附法进行病毒初检,带毒样品汰除或进行热处理脱毒。
B3诱导生根
从初检不带毒样品上切取长1.5cm的嫩梢插入生根培养基中,在25℃下经15~20天即可长出新根。对生根率较低的品种可适当调整生长调节剂的浓度或加入间苯三酚或增加培养代数。
B4移栽
栽前将组培生根苗置于强光下,闭瓶锻炼2天(加少量水)。以腐殖土、砂或蛭石为基质,洗净根部粘附的培养基后栽到基质中,浇透水,盖上塑料薄膜和报纸保湿遮荫,10天后逐渐通风透光,每周浇一次1/4~1/8MS营养液促进生长。初春为移栽适期,温度保持在15~25℃。
B5移人苗圃
将移栽成活的组培苗移到室外炼苗1~2周。圃地开沟打垅,施入基肥,将苗带土移栽,灌足水。
B6病毒检测
8月份从移栽成活苗上剪取带12~15饱满芽的枝条,按芽系编号,采用指示植物进行鉴定。检测后保存无病毒的芽系,将带病毒的芽系汰除或再次热处理。
附 录 C

(标准的附录)

热处理结合茎尖培养脱毒法
C1切取热处理过程中长出的新梢顶端0.3~0.5mm的茎尖进行组织培养。
C2先进行微茎尖组织培养,分化成丛状苗,经过继代扩繁后,先在25℃士3℃的培养室内培养4~5天,再在38℃士l℃的光照培养箱中培养4~6周后,切取3mm左右的茎尖进行培养。
C3对分化的每个芽丛分别编号,经培养成苗,准备病毒检测。

联系我们

现代果业大数据云服务平台
地址:泰安市岱宗大街61号

版权所有 山东农业大学